Культура клітин

Матеріал з Вікіпедії — вільної енциклопедії.
Перейти до: навігація, пошук

Клітинні культури — це генетично однорідні популяції клітин, що ростуть у постійних умовах оточуючого середовища. Це можуть бути штами нормальних клітин людини, тварин, рослин або тканин злоякісних пухлин.

Умови культивування[ред.ред. код]

Флакони із культуральним середовищем для вирощування тваринних клітин

Клітини звичайно поміщають у скляні посудини, звідси і дослідження отримали назву вивчення in vitro (від лат. in — в, vitro — скло), хоча тепер частіше культури вирощують у пластмасових посудинах. Виділені з тканин клітини інкубують при температурі +38 °C +39 °C (для клітин тваринного і людського організмів) та при +22 °C +28 °C (для рослинних клітин) у живильному середовищі відповідного складу. Клітини тоді ростуть у вигляді суспензії або моношару. Суспензійна культура — це вирощування окремих клітин або невеликих їх груп у завислому стані у рідкому живильному середовищі з використанням апаратури, що забезпечує їх аерацію і перемішування. Характерною особливістю суспензійних культур є їх морфологічна та біохімічна гетерогенність. Клітинна популяція містить клітини, які відрізняються за розміром і формою.

Застосування[ред.ред. код]

Застосування у цитології[ред.ред. код]

У цитології даний метод зручний тим, що клітини в культурі легко доступні для різних біохімічних маніпуляцій. При роботі з ними радіоактивні речовини, отрути, гормони та ін. можуть бути введені у потрібній концентрації протягом необхідного періоду часу. Кількість цих речовин може бути на порядок менше, ніж при експерименті на тварині. Зникає загроза того, що речовина буде метаболізована печінкою, екскретована нирками або відкладеться у м'язах. Це забезпечує отримання реальних значень швидкості дії речовини на клітину або її засвоєння клітиною.

Для дослідження живих рослинних клітин використовують культуру ізольованих протопластів. Ізольовані протопласти можна визначити як «голі» клітини рослин, оскільки клітинна стінка видаляється механічним або ферментативним способом. Система ізольованих протопластів дає можливість вести селекцію на клітинному рівні, працювати у малому об'ємі з великою кількістю індивідуальних клітин, отримувати нові форми рослин шляхом прямого перенесення генів, отримувати соматичні гібриди між віддаленими у систематичному відношенні видами. Оскільки в ізольованих протопластах одразу починається регенерація клітинної оболонки, то вони є зручним об'єктом для вивчення формування целюлозних мікрофібрил.

Застосування у вірусології[ред.ред. код]

У вірусології культури клітин використовуються дуже широко, оскільки з ними порівняно легко працювати у лабораторії, на відміну від інших методів — вирощування вірусів на курячих ембріонах або у організмі живих тварин. Крім того на моношарі клітинної культури можна добре вивчити цитопатичну дію вірусів, за утворенням внутрішньо-клітинних включень, бляшок, у реакціях гемадсорбції й гемаглютинації та за кольоровою пробою. При роботі з культурами клітин суттєві результати можуть бути отримані при роботі з невеликою кількістю культур. Експерименти, які потребують для підтвердження того чи іншого факту сотні або тисячі лабораторних тварин можуть бути з рівною статистичною достовірністю поставлені на такій же кількості культур клітин. Таким чином при лабораторії не треба тримати віварій і відсутні етичні аспекти поводження з хворими тваринами.

Також вивчається трансформація клітин вірусами, механізм якої подібний до механізму виникнення злоякісних пухлин.

Застосування у фармакології[ред.ред. код]

Культури клітин широко застосовуються для тестування дії речовин, які можуть бути використані в якості лікарських препаратів. Попри те, що результати, отримані на культурах клітин не можна екстраполювати на весь організм, не викликає сумніву, що якщо та чи інша речовина порушує діяльність клітин з кількох різних лініях культур, то необхідно очікувати негативного ефекту і при введенні цієї речовини у організм.

Застосування у біотехнології[ред.ред. код]

Специфічні культури клітин є цінним джерелом гормонів та інших біологічно активних речовин. Вже зараз вони застосовуються для виробництва противірусного білку інтерферону.

Застосування у генетиці[ред.ред. код]

У генетиці здатність клітин до росту у культурі використовується у наступних напрямках:

  • Клонування
  • Зберігання клітин
  • Отримання мутантних клітин та робота з ними

Типи культур клітин[ред.ред. код]

1. Первинно-трипсинізовані — отримують із подрібнених тканин людини та тварин шляхом їх обробки трипсином чи іншими ферментами. Витримують лише 5-10 поділів (пасажів).

2. Перещеплювані — клітини, які набули здатності до безмежного розмноження, оскільки є похідними пухлин людини та тварин.

3. Напівперещеплювані (диплоїдні) — можуть витримувати до 100 пасажів, зберігаючи при цьому вихідний диплоїдний набір хромосом.

Найбільш розповсюджені лінії клітин[ред.ред. код]

Лінія клітин Розшифровка скорочення Організм Тканина Морфологія Примітки та посилання
293-T людина нирка(ембріональна) Похідна від HEK-293 ECACC
3T3 cells «3-day transfer, inoculum 3 x 105 cells» миша ембріональні фібробласти Відома також як NIH 3T3 ECACC
721 людина меланома
9L криса гліобластома
A2780 людина яєчник рак яєчника ECACC
A2780ADR людина яєчник похідне A2780 з резистентністю до адріаміцину ECACC
A2780cis людина яєчник похідне A2780 з резистентністю до цисплатину ECACC
A172 людина гліобластома злоякісна гліома ECACC
A431 людина шкіряний епітелій плоскоклітинна карцинома ECACCCell Line Data Base
A-549 людина карцинома легень епітелій DSMZECACC
B35 криса нейробластома ATCC
BCP-1 людина периферичні лейкоцити HIV+ лімфома ATCC
BEAS-2B bronchial epithelium + adenovirus 12-SV40 virus hybrid (Ad12SV40) людина легені епітелій ATCC
bEnd.3 brain endothelial миша кора головного мозку ендотелій ATCC
BHK-21 «Baby Hamster Kidney» хомяк нирка фібробласти ECACCOlympus
BR 293 людина молочна залоза рак
BxPC3 Biopsy xenograph of pancreatic carcinoma line 3 людина панкреатична аденокарцинома епітелій ATCC
C3H-10T1/2 миша ембріональні мезенхімальні клітини ECACC
C6/36 комар тканини личинки ECACC
CHO Chinese hamster ovary Cricetulus griseus яєчник епітелій ECACCICLC
COR-L23 людина легені ECACC
COR-L23/CPR людина легені ECACC
COR-L23/5010 людина легені ECACC
COR-L23/R23 людина легені епітелій ECACC
COS-7 Cercopithecus aethiops, origin-defective SV-40 мавпа Cercopithecus aethiops нирка фібробласти ECACCATCC
CML T1 Chronic Myelod Leukaemia T-lymphocyte 1 людина хронічна міелоїдна лейкемія T-клітинна лейкемія Blood
CMT canine mammary tumor собака молочна залоза епітелій
D17 собака остеосаркома ECACC
DH82 собака гістіоцитоз моноцити/макрофаги ECACC

J Vir Meth

DU145 людина карцинома простата
DuCaP Dura mater Cancer of the Prostate людина метастазуючий рак простати епітелій 11317521
EL4 миша T-клітинна лейкемія ECACC
EMT6/AR1 миша молочна залоза епітелій ECACC
EMT6/AR10.0 миша молочна залоза епітелій ECACC
FM3 людина метастази в лімфатичний вузол меланома
H1299 людина легені рак
H69 людина легені ECACC
HB54 гібридома гібридома секретує L243 mAb (проти HLA-DR) Human Immunology
HB55 гібридома гібридома секретує MA2.1 mAb (проти HLA-A2 и HLA-B17) Journal of Immunology
HCA2 людина фібробласти Journal of General Virology
HEK-293 human embryonic kidney людина нирка (ембріональна) епітелій ATCC
HeLa Henrietta Lacks людина рак шийки матки епітелій DSMZECACC
Hepa1c1c7 clone 7 of clone 1 hepatoma line 1 миша гепатома епітелій ECACC

ATCC

HL-60 human leukemia людина мієлобласти клітини крові ECACCDSMZ
HMEC human mammary epithelial cell людина епітелій ECACC
HT-29 людина епітелій товстого кишечника аденокарцинома ECACC

Cell Line Data Base

Jurkat людина T-клітинна лейкемія білі клітини крові ECACC

DSMZ

JY людина лімфобласти В-клітини, іморталізовані EBV
K562 людина лімфобласти хронічна мієлоїдна лейкемія ECACC
Ku812 людина лімфобласти еритролейкемія ECACC

LGCstandards

KCL22 людина лімфобласти хронічна мієлоїдна лейкемія
KYO1 Kyoto 1 людина лімфобласти хронічна мієлоїдна лейкемія DSMZ
LNCap Lymph node Cancer of the Prostate людина аденокарцинома простати епітелій ECACCATCC
Ma-Mel 1, 2, 3….48 людина лінії клітин меланоми
MC-38 миша аденокарцинома
MCF-7 Michigan Cancer Foundation-7 людина молочна залоза інвазивна карцинома протоків молочної залози ER+, PR+
MCF-10A Michigan Cancer Foundation людина молочна залоза епітелій ATCC
MDA-MB-231 M.D. Anderson — Metastatic Breast людина молочна залоза рак ECACC
MDA-MB-468 M.D. Anderson — Metastatic Breast людина молочна залоза рак ECACC
MDA-MB-435 M.D. Anderson — Metastatic Breast людина молочна залоза меланома або карцинома (єдина думка відсутня) Cambridge Pathology ECACC
MDCK II Madin Darby canine kidney собака нирка епітелій ECACC ATCC
MOR/0.2R людина легені ECACC
NCI-H69/CPR людина легені ECACC
NCI-H69/LX10 людина легені ECACC
NCI-H69/LX20 людина легені ECACC
NCI-H69/LX4 людина легені ECACC
NIH-3T3 National Institutes of Health, 3-day transfer, inoculum 3 x 105 cells миша ембріон фібробласти ECACCATCC
NALM-1 периферична кров хронічна мієлоїдна лейкемія Cancer Genetics and Cytogenetics
NW-145 меланома ESTDAB
OPCN / OPCT Onyvax[1] Prostate Cancer…. лінії клітин рака простати Asterand
Peer людина T-клітинна лейкемія DSMZ
PNT-1A / PNT 2 лінії клітин рака простати ECACC
RenCa Renal Carcinoma миша карцинома нирки
RIN-5F миша підшлункова залоза
RMA/RMAS миша T-клітинний рак
Saos-2 людина остеосаркома ECACC
Sf-9 Spodoptera frugiperda бабочка Spodoptera frugiperda яєчник DSMZECACC
SkBr3 людина карцинома молочної залози
T2 людина гібридома В-клітин та Т-клітинної лейкемії DSMZ
T-47D людина молочна залоза карцинома протоків
T84 людина карцинома товстого кишечника/ метастази в легені епітелій ECACCATCC
THP1 людина моноцити гостра мієлоїдна лейкемія ECACC
U373 людина гліобластома-астроцитома епітелій
U87 людина гліобластома-астроцитома епітелій Abcam
U937 людина лейкемічна моноцитарна лімфома ECACC
VCaP Vertebra Prostate Cancer людина метастазуючий рак простати епітелій ECACC ATCC
Vero 'Vera Reno' / 'Vero' ('істина') африканська зелена мартишка епітелій нирки ECACC
WM39 людина шкіра первинна меланома
WT-49 людина лімфобласти
X63 миша меланома
YAC-1 миша лімфома Cell Line Data Base ECACC
YAR людина B-лімфоцити трансформовані EBV [2] Human Immunology

Література[ред.ред. код]

  • Мікробіологія: навчальний посібник для студентів фар­ма­цевтичних вищих навчальних закладів і фармацевтичних факультетів вищих медичних навчальних закладів III—IV рівнів акредитації за спеціальністю «клінічна фармація». Дейнека С. Є., Патратій В. К., Сидорчук І. Й. та ін. — Чернівці: Медик, 2004. — 312 с.

Посилання[ред.ред. код]