Народився 2 червня1978 року в Ферфілді. Майбутній актор виріс в сім'ї театральної актриси і викладача університету. Виховувався Джастін Лонг за суворими релігійними правилами, батьки були католиками. Джастін деякий час навчався в школі єзуїтів в Фейрфілд.
Після закінчення школи (англ.Fairfield College Preparatory School) в Ферфільді, Джастін продовжив навчання в знаменитому коледжі Вассара (англ.Vassar College)[2], який готує найкращих комедійних акторів[3], і також входив до складу комедійної групи коледжу (англ.LaughingStock). Саме тут вперше проявилася пристрасть Лонга до театру — він грає в аматорських спектаклях, працює з молодими акторами як театральний інструктор. З 1992 року, в 14-річному віці Джастін Лонг вперше вступив на знімальний майданчик і почав з цього часу, зніматися в телесеріалах. Найуспішнішим для його акторської кар'єри виявився серіал «Ед» (2000—2004), який знімався телекомпанією NBC. Перша роль у кіно в 1999 році — Брендон Вігер у фільмі «У пошуках галактики». Знімався в знаменитій картині жахів «Джіперс Кріперс», але все життя мріяв про серйозну драматичну роль, яку досі зіграти не вдалося. На даний момент багато знімається в комедіях. Також відомий у ролі комп'ютера Mac в коротких рекламних відеороликах «Get a Mac»[4].