Імуноферментний аналіз (ELISA)
| ELISA | |
|---|---|
 Мікротитрувальна плашка на 96 лунок, що застосовується для проведення ELISA. | |
| MeSH | D004797 |
Імуноферментний аналіз (ІФА, ELISA) або, точніше, ферментний імуносорбентний аналіз (англ. enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA) — імунологічний метод для визначення наявності певних антигенів, шляхом реакції антиген-антитіло. Широко використовується в науково-дослідній роботі та клінічній лабораторній діагностиці. Вперше був описаний у 1971 році.[1]
Загальний принцип ELISA[ред. | ред. код]
Основний принцип ELISA — реакція антиген-антитіло. Якщо антиген (молекула-мішень) являє собою білок, то його очищений препарат звичайно використають для одержання антитіл, за допомогою яких потім і виявляють дану мішень. Раніше використовувались первинні антитіла, що були за своєю природою поліклональними. Розробка і застосування моноклональних антитіл дало змогу значно покращити специфічність імуноферментного аналізу.
Процедура[ред. | ред. код]
Існує цілий ряд підходів, що дозволяють визначити, чи відбулося зв'язування антитіла з антигеном-мішенню. Один з них — це ферментний іммуносорбентний аналіз (ELISA), що часто використовується для діагностики різноманітних антигенів.
- Підготовка підкладки для фіксації досліджуваного зразка;
- Зразок, у якому хочуть виявити специфічну молекулу або мікроорганізм, фіксують на твердій підкладці, наприклад на пластиковій мікротитрувальній плашці, що зазвичай має 96 лунок;
- До фіксованого зразка додають антитіло, специфічне до маркерної молекули (первинне антитіло), потім промивають лунку, щоб видалити молекули первинного антитіла, які не зв'язалися;
- Додають вторинне антитіло, що специфічно зв'язується з первинним і не взаємодіє з маркерною молекулою. До цього антитіла приєднаний фермент (наприклад, лужна фосфатаза, пероксидаза або уреаза), що може каталізувати перетворення незабарвленого субстрату в забарвлений продукт. Промивають лунку, щоб видалити молекули, які не зв'язалися;
- Додають незабарвлений субстрат, що впізнається та утилізується ферментом;
- Проводять якісне або кількісне визначення пофарбованого продукту, за допомогою оцінки оптичної щільності.
Застосування[ред. | ред. код]
Ферментний імуносорбентний аналіз широко застосовується для діагностики різноманітних інфекційних захворювань, ракових процесів (в основному завдяки специфічним білкам і пептидам), визначення концентрації різноманітних низькомолекулярних сполук, таких як токсини, лікарські засоби тощо.
Застосування під час коронавірусної пандемії 2020[ред. | ред. код]
У 2020 році було запропоновано проводити тести, щоб визначити наявність антитіл до коронавірусу SARS-CoV-2.
В Україні тести ІФА-тести було завезено в кінці квітня 2020 року.[2] 5 травня міністр охорони здоров'я Максим Степанов скликав нараду, на якій збираються вирішити як і кого тестувати такими тестами в Україні.[3]
Джерела[ред. | ред. код]
- Б. Глік, Дж. Пастернак, Молекулярна біотехнологія, Москва, Мир, 2002.(С.?)
Примітки[ред. | ред. код]
- ↑ Engvall, E (22 листопада 1972). Enzyme-linked immunosorbent assay, Elisa. The Journal of Immunology. 109 (1): 129—135. ISSN 0022-1767. PMID 4113792. Архів оригіналу за 5 серпня 2020. Процитовано 13 червня 2020.
- ↑ Перші тестування на антитіла до COVID-19 будуть проведені в Одеській і Сумській областях [Архівовано 24 лютого 2022 у Wayback Machine.], Рубрика, 28 квітня 2020
- ↑ МОЗ ще думає як використовувати ІФА-тести, в регіони нічого не розподілялося, - міністр, Рубрика, 4 травня 2020
Посилання[ред. | ред. код]
- ІМУНОФЕРМЕНТНИЙ АНАЛІЗ [Архівовано 3 серпня 2016 у Wayback Machine.] //Фармацевтична енциклопедія
- Анімована ілюстрація проходження аналізу
- Анімоване навчання [Архівовано 12 жовтня 2007 у Wayback Machine.]
- ELISA протокол
- Про ELISA [Архівовано 13 березня 2012 у Wayback Machine.]
|
Це незавершена стаття з медицини. Ви можете допомогти проєкту, виправивши або дописавши її. |
|
